Sigma北美人AB血清H4522血清的質(zhì)量要求

（一）WHO公布的《用動物細胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：

1. 牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家，并應(yīng)具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。

2.有些國家還要求牛血清來自沒有用過反芻動物蛋白飼料喂養(yǎng)的牛群。

3.要能證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。

5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無大腸桿菌噬菌體污染。

6.要求血清對細胞有良好的支持繁殖作用。

（二）我國在對牛血清的質(zhì)量標準z早在2000年版《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標準》中提出。包括物理性狀、總蛋白，血紅蛋白、細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內(nèi)毒素，支持細胞增殖檢查。2005版藥典頒布之后，小牛血清質(zhì)量標準被納入《中國藥典》2005年版 第三部 生物制品分冊。

（三）美國對牛血清的質(zhì)量要求：

Gibco 和Hyclone等美國主要血清供應(yīng)商的牛血清都已進入到我國市場，他們對血清質(zhì)量標準有嚴格要求，從血清來源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。

1、血清來源 ：可從世界各地收集胎牛血清，但必須符合其質(zhì)量標準和美國農(nóng)業(yè)部進口要求。

2、血清的收集：必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準，低溫采集，一次分離，分離后立即混合凍存。

3、血清的制備：超低IgG胎牛血清、透析血清、γ-射線輻照；

4、除菌過濾：0.22μm和0.1μm濾膜過濾；

5、成品分裝：根據(jù)需要分裝成不同規(guī)格。

Sigma北美人AB血清H4522保存方法

1、需要長期保存的（Sigma人AB血清H4522）血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可 將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一 定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接 過濾血清。

3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全 部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度 與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而 出現(xiàn)沉淀。

4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體 成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體 參與反應(yīng)有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞 發(fā)生化學趨化和活化。

5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身 的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物 的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑 點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。

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