細(xì)胞名稱

MCF7-ADR人乳腺癌細(xì)胞耐藥株

種屬

人

細(xì)胞來源

ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)

傳代

1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代，一般2天換一次液；

2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%，需要對其進(jìn)行傳代，傳代比例為1:2到1:3；

3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于室溫預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶，置于室溫孵育消化（*次消化需置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為zui佳消化時間，記錄zui佳消化時間，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1000rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。（具體根據(jù)隨貨說明書進(jìn)行操作）

保存

凍存條件：*培養(yǎng)基+FBS+DMSO

(備注：建議使用本公司的培養(yǎng)條件，用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞，不能預(yù)熱后使用。)

保存條件：液氮存儲

供應(yīng)限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加 10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間長不宜超過 72 小時）

3.細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時后觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，

MCF7/Taxol人乳腺癌姿杉醇耐藥株

hct8/5-fu 人回腸直腸腺癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

LOVO/5-FU人結(jié)腸癌細(xì)胞 五氟尿嘧啶耐藥株

HCT116/L 人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞

MCF7-ADR人乳腺癌細(xì)胞耐阿霉素細(xì)胞株

HL60/ADR人早幼粒急性白血病細(xì)胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R) 人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼株

LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞 阿霉素耐藥株

HNE1-DDP人鼻咽癌細(xì)胞順鉑耐藥株

sgc7901 5-fu人胃癌細(xì)胞 五氟尿嘧啶耐藥株

A549/DDP人肺癌細(xì)胞DDP耐藥株

mcf7 ddp 人乳腺癌細(xì)胞DDP耐藥株

A549/adr 人肺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

sgc7901/DDP人胃癌細(xì)胞 五氟尿嘧啶耐藥株

skov3/ddp人卵巢癌細(xì)胞DDP耐藥株