關于胎牛血清（血清）FBS基礎知識
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今天我們要講的是細胞培養“主角”---血清
血清是一種*培養基，含有細胞生長繁殖所需的多種營養成分，如蛋白質、多肽等，多用于細胞培養、生物制品及診斷試劑的生產。
血清的主要成分是蛋白質，如：白蛋白，球蛋白，纖維粘連素（促進細胞附著）、α2巨球蛋白（抑制胰蛋白酶的作用），激素，胰島素（可促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸，促細胞分裂），類胰島素生長因子（能與細胞表達的胰島素受體結合，從而產生與胰島素相同的作用），促生長激素（細胞增殖），胎球蛋白（促細胞附著），轉鐵蛋白（能結合鐵離子，減少其毒性）。血清的組成成分與含量常常與供血動物性別、年齡、生理條件和營養條件有關。
那么如何挑選合適的血清？使用血清時，需要注意哪些問題？請大家跟隨我們進入文韌生物知識小課堂進行學習起來吧 ! Let’s go!
胎牛血清和新生牛血清的區別是什么？
取血年齡不同：牛血清按照牛取血時間或牛齡可進行區分。胎牛血清（Foetal Bovine Serum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。
國產胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時，且未進行哺乳（unsuckled）進食的牛，有時還稱作國產新生牛。
新生牛血清（Newborn Calf Serum，簡稱NBCS）指的是出生14天-3個月進行取血的牛。
成年牛血清（Adult Bovine Serum，簡稱ABS）指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。
以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業的發展及法規限制影響，因為牛血多為畜牧業副產業，并未有專門為取血而養的牛。
組分與比例不同：這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規來說，年齡越小的牛血清，細胞培養效果越好。胎牛血清培養效果好于新生牛，且因為胎牛未進食過母乳，所以IgG含量低。
用途與用法不同：根據細胞所需生長條件可確定。
如何挑選適合細胞生長的血清？
原代或是正常細胞株建議使用特級胎牛血清或者優等胎牛清，對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清，或胚胎干細胞胎牛血清。
由于血清有批間差異，細胞種類不同，我們建議客戶購買前可先申請試用樣品，通過篩選得到滿意的血清批號，之后根據項目需求可進行批量囤貨，以保證該項目所需血清zhi量的一致性，可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。
如何正確保存血清？
需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱（未開封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請勿超過1個月，若一次無法用完一瓶，建議將血清無菌分裝并冷凍。
如何解凍血清？
血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現沉淀。
需要對新買的血清進行過濾嗎？
血清在ISO13485認證的廠房中生產，經過3次0.1μm過濾，出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養測試及無菌檢測，污染幾率非常低。通常細胞污染有非常多的可能性，根據協助使用者進行分析檢測，結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。
除了對血清進行檢測，有何更直觀的方式分辨血清質量？
目測法，我們可根據血清的顏色，沉淀，澄清度等進行區分。
顏色：顏色根據血清蛋白含量的不同，可表現出黃色或者紅色。進口血清質量zui好的呈現出淡黃、微紅色，較差質量呈現出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當的，由于血紅蛋白的破壞氧化，會呈現出暗紅色，甚至咖啡色。
沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多，使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融，因此成品清澈。
澄清度：進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低，表現為稀薄、清淡。國產血清絕大多數為新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深。
為何血清會存在批間差？如何避免此影響？
因為血清來源于動物，其組成成分有1000種左右，每個批號的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。
為了避免批間差異對細胞的影響，XP建議先進行批號測試，篩選合適的批號，備好庫存（血清未開封時，在-20℃下可保存5年）。如需更換血清批次或產地，建議先試用后再大量訂購。
血清中沉淀是什么成分？造成原因有哪些？如何預防和處理沉淀？
血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），甲胎蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻粘連蛋白，磷酸鈣[1]（顯微鏡下小黑點沉淀），膽固醇等。
原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復凍融，長期儲存于2-8℃或者室溫。
預防措施與建議：因此不立即使用的血清應保存在-20℃或以下。
血清為何要熱滅活，有必要對所有血清都滅活嗎？如何正確的進行滅活？
加熱可以滅活補體系統。啟動的補體系統參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中，培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。
實驗顯示，熱滅活血清對大多數的細胞而言是不需要的，對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用，還可能造成生長速率降低，沉淀物還會顯著增多，不利于細胞觀察。因此，若非必須，不需要對血清進行滅活處理。
將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min，建議加放空白對照（同體積水）使用溫度計測溫，以測得溫度為56℃時為計時起始點，加熱中可不時輕度旋轉混勻血清。
好啦
本期介紹到此結束
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